内容简介
在实验中,你是否严格遵循标准流程却一无所获?你是否想改进你的工作?你想更多地了解某一研究领域的各种方法吗?或许“实验者”丛书将对你有所帮助。
本书是“实验者”系列中的一本,从权威人士的观点,为你讲述蛋白质生物化学和蛋白质组学研究的新方法。你能够充分体会到作者饱尝了实验室的挑战带给他们的激动和沮丧。有了这些技巧和诀窍,你的实验成功的几率将更高。但这本颇有价值的实验室手册并非人是一部方法集锦:
它为你指明走出实验困境的道路,培养你适时选择正确实验的直觉。
它简洁明了地概括了常规方法(例如柱层析、凝胶电泳)的步骤,还列出了不同方法的优缺点。
它详细介绍了配体结合实验、抗体生产和微序列分析方面的进展。
它论述了一些特殊方法,例如膜蛋白的溶解和重组,糖蛋白分析,或寡聚体蛋白质亚基的确定。
其中一节对蛋白质组学进行了导向性说明。
不仅如此,与该系统其他书一样,当你对自己产生了怀疑,不知自己为什么做这一切的时候,这本书以振奋人心的坦诚,引导你走出“灵魂的深夜”。
本书适于生物化学与分子生物学、遗传学、功能基因组学、蛋白质生物化学和蛋白质组学等生命科学相关领域的研究所、高校相关院系实验室的教师、研究生、科研人员,以及生物技术企业的研发者和决策者参考使用。
目录
前言
第四版前言
致谢
缩略语
1 常规技术
1.1 缓冲液的配制
1.2 蛋白质定量
1.3 凝胶电泳
1.4 凝胶染色
1.5 沉淀和浓缩
1.6 印迹
1.7 凝胶和印变的放射自显影
2 配体结合
2.1 放射性配体标记
2.2 结合
2.3 结合数据的分析
2.4 配体交联
2.5 结合蛋白的用途
3 膜蛋白的溶解
3.1 去垢剂
3.2 溶解
4 通过功能测定检测蛋白质
4.1 转运体
4.2 膜蛋白的重组还原
4.3 通量实验
4.4 一些建设性的意见
5 去除杂质和纯化
5.1 纯粹娱乐——蛋白质纯化的过程
5.2 常规纯化方法
5.3 亲和层析
5.4 纯度检验
5.5 纯化蛋白的作用
6 抗体
6.1 多克隆抗体的获得
6.2 免疫沉淀
6.3 免疫亲和层析
6.4 不纯蛋白的抗体
6.5 免疫学检测技术
7 蛋白质组学
7.1 简介
7.2 取样
7.3 双向凝胶电泳
7.4 肽和蛋白质质谱
7.5 蛋白质芯片
7.6 微序列分析
7.7 策略性的观点
8 亚基
8.1 亚基的数量与比例
8.2 什么力量使我们在一起?——亚基间的结合
9 糖蛋白
9.1 蛋白质糖基化的方式、位点和作用
……
10 凝聚宝藏:论文的写作
11 沙漠探险:文献的调研
附录A 专业资源